13 janvier 2016

Trois publications différentes, issues d'équipes distinctes, ont été publiées ces dernières semaines sur la biologie de Leishmania infantum. Deux concernent sa transmission au chien, la dernière met en évidence l'apparition de résistance à l'allopurinol en cours de traitement.

Leishmanies vivantes dans des tiques

C’est une équipe brésilienne qui s’est intéressée au rôle possible des tiques dans la transmission de la leishmaniose canine. Dans une région d’enzootie, des chiens soit apportés par leur propriétaire soit errants, ont été anesthésiés, pour collecte de tiques et prise de sang. Vingt-sept des 48 chiens ont fourni 130 Rhipicephalus sanguineus. Les tiques ont été disséquées (prélèvement des glandes salivaires d’une part, des intestins d’autre part). Leurs organes ont été soit mis en culture (5/44 positives), soit soumises à PCR spécifique de Leishmania (25 tiques positives, provenant de 10 chiens). Le séquençage des amplicons de la PCR a confirmé qu’il s’agissait de L. infantum. En parallèle, 34 chiens ont été trouvés positifs en sérologie, PCR ou les deux. Toutes les tiques positives provenaient de chiens parasités. Le fait que la culture fournisse « des formes flagellées viables » est en faveur « du potentiel de cette espèce de tique de transmettre la leishmaniose » canine. Il reste aux auteurs à évaluer pendant combien de temps une tique reste potentiellement infectieuse. En France, R. sanguineus est surtout abondante dans le Sud-Est de la France (Corse incluse).

Six ans de suivi

Une équipe américaine a conservé trois chiots nés d’une mère naturellement infectée (paucisymptomatique) par L. infantum. La portée comptait 15 chiots, mais les 12 autres avaient été sacrifiés dans le cadre d’une étude antérieure (10 infectés sur les 12). Ces trois survivants ont été remis au chenil d’origine de la mère à trois mois d’âge, alors qu’ils ne présentaient aucun signe d’infection (ni en PCR, ni en sérologie). Ils y ont vécu ensemble, laissés tranquilles pendant 6 ans, sauf pour une prise de sang tous les 6 mois. Le chenil était localisé hors de zone à risque de leishmaniose. Pourtant, les trois chiens ont été trouvés positifs en PCR entre 2 et 3 ans, chacun à 6 mois d’intervalle. Par la suite, les trois chiens ont eu des profils sérologiques et PCR totalement différents.

Transmission verticale

• Le premier chien a eu une montée progressive du titre sérologique anti-Leishmania, à partir de la 2^e année, alors que sa réponse à médiation cellulaire, élevée sur les deux premières années de vie, s’était effondrée. Il n’a pas présenté de résultats constants de parasitémie (évaluée en PCR quantitative), mais a commencé à présenter des signes cliniques de leishmaniose à la fin du suivi.
• Le 2^e chien a présenté une forte montée de sa réponse à médiation cellulaire à partir de la 4^e année, alors que la réponse sérologique et la parasitémie augmentaient régulièrement. Il est resté asymptomatique à la fin du suivi.
• Le 3^e chien a présenté une forte population des lymphocytes de la réponse cellulaire, dès le début et jusqu’à la fin du suivi. Il a présenté une faible parasitémie lors de la 2^e année du suivi, puis s’est négativé (et était séronégatif à partir de la 3^e année).

Ainsi, il n’y a pas d’immunotolérance à la suite de l’infection in utero. En revanche, un contrôle négatif à trois mois d’âge ne sera pas forcément prédictif d’un statut indemne. Les auteurs recommandent aux éleveurs de prendre des précaution lors de la mis à la reproduction de chiens leishmaniens.

Chiens en rémission ou rechute

La première description de résistance à l’allopurinol avérée à la fois par la clinique et in vitro a été publiée cette semaine. Pour évaluer si les rechutes de leishmaniose de chiens traités à l’allopurinol seul (10 mg/kg PO toutes les 12 h) étaient ou non liées à la sélection de résistance, des parasitologistes cliniciens israéliens ont isolé le parasite (aspiration à partir du ganglion lymphatique préscapulaire ou poplité) à partir de 19 chiens médicalement bien suivis.

• Un premier groupe de 10 chiens a été constitué au moment du premier diagnostic de leishmaniose (pas encore traités) ; ils présentaient des signes cliniques « modérés à sévères ».
• Le 2^e groupe compte 5 chiens qui avaient été diagnostiqués sur les mêmes critères, mais en cours de traitement à l’allopurinol et en phase de rémission depuis plus de 3 mois (asymptomatiques).
• Les 4 chiens du 3^e groupe avaient reçu pendant au moins trois mois un traitement à l’allopurinol, avaient présenté une rémission, mais rechuté ensuite. Le protocole est résumé par un tableau des auteurs (en anglais).

Résistance à l'allopurinol

Pour 3 souches du groupe  “non traité” et du groupe ”rechute”, la culture a fourni exactement la même cinétique de croissance in vitro. Les auteurs les ont donc ensuite cultivées en présence d’allopurinol, pour évaluer la concentration inhibitrice 50 % (CI₅₀) des 19 souches. Ils observent que les promastigotes du groupe “rechute” ont une CI₅₀ presque cinq fois plus élevée que celle des souches des autres groupes (p=0,01). Les auteurs ont également réalisé le test avec les parasites à l’intérieur de macrophages, in vitro, et obtiennent la même différence. Il n’y avait toutefois pas de relation entre la valeur de la CI₅₀ et la durée du traitement au moment du prélèvement.

Les auteurs préviennent qu’ils ne font que supposer que cette “résistance” est liée à la pression de sélection liée au traitement. Ils conviennent qu’ils ne peuvent pas exclure qu’il s’agisse d’une ré-infection des chiens par une souche résistante. Ils avaient sélectionné les cas suivis en excluant ceux ayant d’autres pathologies (néoplasies), et donc excluent a priori que les rechutes soient liées à une immunodépression. Ils concluent sur l’aspect préoccupant de l’existence de ces résistances, en raison du rôle de réservoir de ces chiens vis-à-vis de leurs congénères, mais aussi de la nature zoonotique de Leishmania infantum.